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公司基本資料信息
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基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì),抗體,多肽等樣品的序列分析,是對樣品氨基酸序列的分析。質(zhì)譜測序即指基于質(zhì)譜對樣品一級結(jié)構(gòu)氨基酸序列的測定。在進(jìn)入質(zhì)譜序列分析之前,我們先對幾個(gè)定義進(jìn)行簡單的介紹。氨基酸是含有胺(-NH2)和羧基(-COOH)官能團(tuán)以及每個(gè)氨基酸特有的側(cè)鏈(R基團(tuán))的有機(jī)化合物。肽是由肽鍵連接的兩個(gè)至五十個(gè)氨基酸組成的短鏈。多肽是更長,連續(xù),不分支的肽鏈,最多可包含約五十個(gè)氨基酸的較長的肽鏈。包含五十個(gè)以上氨基酸的多肽/肽鏈被稱為蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)由一種或多種以生物學(xué)功能基團(tuán)方式排列的多肽組成,通常可結(jié)合至配體(例如輔酶和輔因子),另一種蛋白質(zhì),其他大分子(例如DNA或RNA)或更復(fù)雜的大分子裝配體??贵w(Ab),也稱為免疫球蛋白(Ig)則是主要由漿細(xì)胞產(chǎn)生的大的Y形蛋白質(zhì),被免疫系統(tǒng)用來中和病原體,例如病原細(xì)菌和病毒。
基于質(zhì)譜的蛋白測序
基于質(zhì)譜的單克隆抗體測序
基于質(zhì)譜的多肽序列分析
較Edman降解法而言,質(zhì)譜法測序的優(yōu)點(diǎn)在于,質(zhì)譜法更敏感,可以更快地裂解肽,可以識別末端封閉或修飾的蛋白樣品。百泰派克生物科技利用現(xiàn)有的高分辨率質(zhì)譜技術(shù)平臺,提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的序列分析服務(wù),可實(shí)現(xiàn)對所測定靶蛋白序列100%的覆蓋。
質(zhì)譜測序示意圖
蛋白樣品序列分析過程一般只會使用Trypsin對蛋白進(jìn)行酶切,鑒定到的肽段覆蓋率大概在60%。為了得到靶蛋白的全部序列信息,百泰派克生物科技會選用在蛋白序列分析過程中常用的6種蛋白酶(Trypsin、Chymotrypsin、Asp-N、Glu-C、Lys-C和Lys-N)分別對靶蛋白進(jìn)行酶切和質(zhì)譜測定,在得到碎裂肽段片段的同時(shí),經(jīng)過肽段之間的拼接完成蛋白序列100%的測定。百泰派克使用Thermo公司最新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀實(shí)現(xiàn)對蛋白樣品的序列分析,Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀是現(xiàn)在分辨率和靈敏度最高的質(zhì)譜儀,保證了低豐度肽段碎裂片段鑒定的靈敏度;同時(shí)在肽段碎裂過程中采取HCD與ETD結(jié)合的模式,保證肽段碎裂片段的完整性??梢詫?shí)現(xiàn)蛋白樣品的N端,C端序列分析,蛋白全長序列分析。對未知理論序列的樣品,可通過從頭測序法進(jìn)行序列分析。
蛋白質(zhì)N/C端測序
蛋白全序列測定
蛋白從頭測序和突變分析
How to order?
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