SILAC是細(xì)胞培養(yǎng)條件下穩(wěn)定同位素標(biāo)記技術(shù)(Stable Isotope Labeling By Amino Acids In Cell Culture, SILAC)的簡(jiǎn)稱。SILAC實(shí)驗(yàn)流程是：細(xì)胞培養(yǎng)基中加入輕、中或重型穩(wěn)定同位素標(biāo)記的必需氨基酸賴氨酸(Lys)和精氨酸(Arg)，在細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中使新合成的蛋白會(huì)帶上穩(wěn)定同位素標(biāo)簽。等量混合各類型蛋白質(zhì),酶解后進(jìn)行質(zhì)譜分析。通過(guò)比較一級(jí)質(zhì)譜圖中不帶標(biāo)記/帶同位素標(biāo)記質(zhì)譜峰型的面積大小進(jìn)行相對(duì)定量，同時(shí)二級(jí)譜圖對(duì)肽段進(jìn)行序列測(cè)定從而進(jìn)行蛋白鑒定。與SILAC類似，二甲基Dimethyl標(biāo)記也是一種同位素蛋白標(biāo)記的方法。Dimethyl是一種小分子同位素化學(xué)標(biāo)記物，通過(guò)化學(xué)標(biāo)記的方法標(biāo)記細(xì)胞裂解后的蛋白或多肽的N端或者賴氨酸的ε氨基基團(tuán)，使蛋白／多肽標(biāo)記上不同的Dimethyl標(biāo)簽。除了標(biāo)記方法的差別外，SILAC/Dimethyl兩種標(biāo)記的質(zhì)譜分析方法基本一致，而且具有相近的分析精度和廣度，在定量蛋白組學(xué)分析研究中受到越來(lái)越廣泛的運(yùn)用。

百泰派克公司采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF質(zhì)譜平臺(tái)，Orbitrap Fusion質(zhì)譜平臺(tái)，Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，推出基于SILAC/Dimethyl的定量蛋白組分析服務(wù)技術(shù)包裹，您只需要將您的實(shí)驗(yàn)?zāi)康母嬖V我們并將您的細(xì)胞寄給我們，我們會(huì)負(fù)責(zé)項(xiàng)目后續(xù)所有事宜，包括細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞標(biāo)記、蛋白提取、蛋白酶切、肽段分離、質(zhì)譜分析、質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)分析、生物信息學(xué)分析。

SILAC定量蛋白組學(xué)實(shí)驗(yàn)流程

關(guān)于樣品

1.您只需使用干冰將凍存細(xì)胞寄給我們即可，同時(shí)保證細(xì)胞具有可以傳代培養(yǎng)5次以上的能力；

2.如果您需要自己標(biāo)記細(xì)胞并完成細(xì)胞的刺激等處理過(guò)程，您只需要將標(biāo)記完成并且經(jīng)過(guò)處理的細(xì)胞樣品或者蛋白樣品干冰寄給我們即可；對(duì)于每個(gè)樣品，需要保證含有50-100ug蛋白。

Silac與Dimethyl標(biāo)記法對(duì)比

總的來(lái)說(shuō)，SILAC的重復(fù)性比Dimethyl稍高一些，因?yàn)椴煌腟ILAC樣品在蛋白酶切之前就已經(jīng)混合在一起，而Dimethyl標(biāo)記的是酶切后的多肽片段，受到體系穩(wěn)定性影響更多，因此重復(fù)性稍遜于SILAC。但是Dimethyl作為一種優(yōu)質(zhì)價(jià)廉的標(biāo)記手段也得到越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。

中/英文項(xiàng)目報(bào)告

在技術(shù)報(bào)告中，百泰派克會(huì)為您提供詳細(xì)的中英文雙語(yǔ)版技術(shù)報(bào)告，報(bào)告包括：

1. 實(shí)驗(yàn)步驟（中英文）
2. 相關(guān)的質(zhì)譜參數(shù)（中英文）
3. 鑒定的磷酸化位點(diǎn)的詳細(xì)信息
4. 質(zhì)譜圖片
5. 原始數(shù)據(jù)

SILAC/Dimethyl定量蛋白組學(xué)一站式服務(wù)

您只需下單-寄送樣品
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