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大鼠原代心肌細胞分離試劑盒AC-1002017

點擊圖片查看原圖
 
品牌: Applied Cell(上海埃澤思)
產(chǎn)品名稱: 新生大鼠原代心肌細胞分離試劑盒
貨 號: AC-1002017
保存條件: 詳見產(chǎn)品內(nèi)容
單價: 3798.00元/瓶
起訂: 1 瓶
供貨總量: 1000 瓶
發(fā)貨期限: 自買家付款之日起 3 天內(nèi)發(fā)貨
所在地: 上海
有效期至: 長期有效
最后更新: 2024-01-02 15:03
瀏覽次數(shù): 759
詢價
 
公司基本資料信息
詳細說明


新生大鼠原代心肌細胞分離試劑盒

產(chǎn)品基本信息

產(chǎn)品名稱

Applied Cell?大鼠原代心肌細胞分離試劑盒

貨    號

AC-1002017

保存條件

詳見產(chǎn)品內(nèi)容

使用范圍

大鼠原代心肌細胞分離培養(yǎng)

保質(zhì)期

12個月

產(chǎn)品簡介

大鼠原代心肌細胞分離試劑盒是埃澤思生物科技有限公司Applied Cell?開發(fā)的一款用于新生大鼠心臟原代心肌細胞分離和培養(yǎng)的高效試劑盒。在細胞分離中,充分優(yōu)化分離過程以及培養(yǎng)試劑,可獲得高純度、高活性的原代心肌細胞。

產(chǎn)品特性

高效分離原代心肌細胞,產(chǎn)量提高1.5-4倍。

可分離得到高純度、高活性心肌細胞。

產(chǎn)品內(nèi)容

試劑

規(guī)格

數(shù)量

保存

運輸

Wash buffer

125ml

2

2-8

冰袋

Rat Cardiomyocytes Culture Medium

125ml

2

2-8

冰袋

Ready-to-use Gel

100ml

1

2-8

冰袋

Ready-to-use Gel

100ml

1

2-8

冰袋

Rat Cell Dissociation Solution

125ml

1

-20保存

干冰

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大鼠心肌細胞維持培養(yǎng)基Applied Cell?: Cat. no.AC-1001036 

實驗準備

A. 使用75%酒精擦拭試驗臺;

B. 準備酒精燈、酒精棉及用于盛放實驗處理后大鼠的垃圾袋;

C. 剪刀、鑷子、微型鑷子等解剖用具需提前進行滅菌處理;

D. 吸取適量Wash Buffer至培養(yǎng)皿中并放置于冰上(細胞房內(nèi)操作)。

注意:細胞房和超凈工作臺需提前進行紫外滅菌處理;培養(yǎng)皿大小的選擇取決于實

驗時所取心臟的數(shù)目,Wash Buffer一直放于冰上保持低溫。

E. Rat Cell Dissociation Solution在4融化,分裝,放-20長期保存,不要反復凍存。

F. 培養(yǎng)板用Ready-to-use Gel提前60min包被。(6孔板:1ml/孔;10cm dish:7ml/孔)

操作方法

1. 取心臟

A. 左手捏住大鼠背部皮膚,使用酒精棉(75%酒精)擦拭小鼠胸腹,用解剖剪在小鼠劍突處正中線偏左向上剪開,略壓胸骨,使心臟自然跳出,用彎鑷子勾住心臟根部,取出心臟,置于盛有預冷Wash buffer的培養(yǎng)皿中。

B. 在解剖鏡下使用微型鑷子和解剖剪剪去心房。

2. 組織清洗經(jīng)酒精擦拭后,將培養(yǎng)皿移入細胞房超凈工作臺,用預冷的Wash buffer清洗3次,去除血污后,將心臟剪成約1mm3的組織塊,再清洗2次。

3. 預消化

加入1-3ml Rat Cell Dissociation Solution ,37℃水浴中搖動,消化1min后棄上清。

4. 消化

A.50ml離心管中加入5ml Rat Cell Dissociation Solution,37水浴中搖動消化7min后將上清液加入預冷5ml Rat Cardiomyocytes Culture Medium中,混合均勻并置于冰上,保持低溫。

注意:每次Rat Cell Dissociation Solution使用的量可根據(jù)組織塊的多少進行調(diào)整。

B. 重復4.A的步驟直至組織完全消化。

注意:吸取上清時盡量避免吸出沉淀。

C.將收集的上清在室溫下1260rpm,離心5min,輕輕吸除上清,用Rat Cardiomyocytes Culture Medium重懸細胞。

5. 差速貼壁:

細胞通過70um/100μm網(wǎng)過濾,并通過以下方式進行差速貼壁,

A、直接接種到培養(yǎng)板中;

B、接種到使用Ready-to-use Gel包被培養(yǎng)板上;

A、B選擇一種方法進行差速貼壁即可,放入細胞培養(yǎng)箱(37,5%CO2孵育60min-90min,進行差速貼壁;

此時,使用Ready-to-use Gel 包被培養(yǎng)板,以備后續(xù)細胞鋪板使用。

注意:孵育時間根據(jù)不同品牌培養(yǎng)板貼壁能力不同,貼壁時間可以做出適當調(diào)整。因為不同品牌培養(yǎng)板貼壁能力不同,B選項進行包被,可以提高細胞貼壁比例。

6. 細胞鋪板:

取出差速貼壁培養(yǎng)皿,將上清細胞懸液移入15ml離心管中,1260rpm,離心5min,輕輕吸除上清,用已經(jīng)預先加熱至37℃1-2ml Rat Cardiomyocytes Culture Medium重懸細胞。利用血細胞計數(shù)板進行細胞計數(shù),用臺盼藍檢測細胞存活率。根據(jù)所計的細胞數(shù)使用Rat Cardiomyocytes Culture Medium進行稀釋調(diào)整細胞濃度,將細胞移至預先使用Ready-to-use Gel包被培養(yǎng)皿/板中。

7. 觀察

將培養(yǎng)板放入細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后觀察細胞狀態(tài),若細胞狀態(tài)佳且濃度合適,則可進行后續(xù)實驗。

細胞形態(tài)圖


                               大鼠心肌細胞熒光染色圖 200×

 


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