蜂王漿是上公認(rèn)的可供人類直接服用的高活性成分的營養(yǎng)食品。10- 羥基-2- 癸烯酸(10-HDA)是蜂王漿中特有的一種不飽和脂肪酸，由于這種酸在自然界的其它物質(zhì)中沒有，只存在于蜂王漿中，所以也稱為王漿酸。分離出的純王漿酸呈白色晶體，在新鮮的蜂王漿中多以游離形式存在，性質(zhì)比較穩(wěn)定，具有很好的殺菌、抑菌、抗疲勞、抗衰老作用和抗癌、抗放射的功能，為此許多保健食品均添加有蜂王漿。因此作為評價(jià)蜂王漿及其制品質(zhì)量優(yōu)劣的主要指標(biāo)之一的10-HDA 含量測定顯得尤其重要。至今為止，10-HDA 含量測定有薄層掃描法、分光光度法、氣相法、液相法，且多見于分析蜂王漿中的10-HDA 。薄層掃描法、分光光度法專屬性和準(zhǔn)確性較差，氣相法處理繁瑣，目前為通用的是H P L C法。

潤揚(yáng)儀器采用蜂王漿中葵烯酸檢測分析液相色譜儀樣品處理簡單、結(jié)果準(zhǔn)確，本公司基于以上情況，建立了超聲提取、冷藏沉淀后，用對羧基苯甲酸乙酯做內(nèi)標(biāo)，反相液相色譜法測定蜂王漿及其制品中1 0 -H D A 含量的方法，取得了令人滿意的結(jié)果。

一、主要性能特點(diǎn):

1）、蜂王漿中葵烯酸檢測分析液相色譜儀潤揚(yáng)LC-3000C整套系統(tǒng)由P3000高壓輸液泵（二元梯度）、UV3000分光檢測器、分析型動態(tài)高壓混合器、進(jìn)樣閥、溶劑托盤、色譜柱、反控色譜工作站軟件等組成；安裝、調(diào)試及使用都非常簡單。

2）、P3000高壓輸液泵是以CPLD技術(shù)為核心，由單片機(jī)控制的高輸液泵系統(tǒng)。全數(shù)字頻率發(fā)生系統(tǒng)，馬達(dá)驅(qū)動系統(tǒng)友好的人機(jī)顯示界面使操作很方便，泵頭及單項(xiàng)閥設(shè)計(jì)思路，融匯了當(dāng)今色譜技術(shù)的經(jīng)驗(yàn)，使該系統(tǒng)在各種條件下都能保證輸液的精度及重復(fù)性。

3）、UV3000是一種分光檢測器，可以匹配任何輸液泵，適用于化學(xué)分析、農(nóng)藥、制藥、化工等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。采用了全數(shù)字、高集成化設(shè)計(jì)理念，大大降低儀器的噪聲；基于數(shù)字信號傳輸和處理，該檢測器的信號可直接輸入到計(jì)算機(jī)的串行口進(jìn)行采集，完全甩掉了傳統(tǒng)儀器必須使用的數(shù)據(jù)采集卡！

二、儀器主要配置和檢測分析條件：

(1). 蜂王漿中葵烯酸檢測分析液相色譜儀主要儀器配置：

1、潤揚(yáng)LC-3000液相色譜儀；2、色譜柱：C18，250*4.6*10 或250*4.6*5；3、高速離心機(jī)（大于4500r/min；50ml）；4、超聲波震蕩儀；5、渦旋混合器；6、分析天平（萬分之一）；7、溶劑過濾器（帶0.45um有機(jī)、水系過濾膜和真空泵）。

（2）.主要試劑：

1.純凈水（二次蒸餾水） 2.甲醇：分析醇 3.乙醇：優(yōu)級純 4.內(nèi)標(biāo)物：對羥基苯甲酸甲酯含量99.0% 5.10-HAD標(biāo)準(zhǔn)品：99.0%以上。使用前應(yīng)在放有濃硫酸的減壓干燥器內(nèi)減壓干燥24h 6.10-HAD標(biāo)準(zhǔn)溶液：取干燥后的10-HAD標(biāo)準(zhǔn)品約25mg，稱定，加無水乙醇溶解并移入1000ml容量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻。此溶液每毫升含內(nèi)標(biāo)物約0.65mg。7.鹽酸（C=0.03mol/L）：量取0.1mol/L鹽酸100ml，加入200ml重蒸餾水中。

（3）.色譜條件：

色譜柱為Kromasil C18 柱，流動相為V(甲醇):V(水):V(磷酸)=55:45:0.2，流速1.0ml/min，對羧基苯甲酸乙酯作內(nèi)標(biāo)，檢測波長210nm。本法簡單、快速、準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，回收率高(97.6%～101.8%)。

（4）.樣品處理

樣品解凍至室溫后用玻璃棒攪勻，取約0.5g，置于已稱定的50ml容量瓶中，稱定，加0.03mol/L鹽酸1ml和水2ml，置漩渦混合器上混合使樣品溶解，加無水乙醇30ml，邊加邊輕輕搖動，再加入內(nèi)標(biāo)溶液10ml，并用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，立即置超聲波中超聲15min，或置漩渦混合器上振蕩15min，取出，在3000r/min下離心10min后測定。如不能及時(shí)測定，應(yīng)放置在冰箱中冷藏待測。