何為磁珠法核酸提取技術(shù)
說(shuō)到磁珠法核酸提取技術(shù),先給大家介紹一下什么是生物磁珠。
生物磁珠是一種內(nèi)含納米磁性粒子的高分子微球,具有粒徑小、表面積大、偶聯(lián)容量高、懸浮穩(wěn)定性好等特點(diǎn),便于各種吸附和反應(yīng),磁珠表面在包被上有活性基團(tuán)后,可以與多種生物活性物質(zhì)發(fā)生偶聯(lián),兼具有液體的流動(dòng)性和固體磁性材料等特點(diǎn)。在外磁場(chǎng)的作用下磁珠可以定向移動(dòng)和集中,當(dāng)撤去外磁場(chǎng)后,又可以恢復(fù)原來(lái)的結(jié)構(gòu)與狀態(tài),從而使復(fù)雜的液固分離技術(shù)變得快捷簡(jiǎn)便,通過(guò)簡(jiǎn)單的洗脫即可得到純度很高的靶向物質(zhì)。在工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、科研院所、醫(yī)療衛(wèi)生、法醫(yī)刑偵等領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用前景。
磁珠法核酸提取技術(shù)就是一項(xiàng)以生物磁珠為依托,配合一系列裂解試劑、結(jié)合試劑、洗滌試劑和洗脫試劑來(lái)分離、純化核酸的高新技術(shù)。
目前這項(xiàng)技術(shù)用的最多的還是依靠國(guó)外進(jìn)口的試劑盒來(lái)做,不僅價(jià)格昂貴,而且售后服務(wù)也沒(méi)有真正的跟上。殊不知,經(jīng)過(guò)二十多年的研發(fā)攻關(guān),一家名為惠爾納米科技的公司在國(guó)內(nèi)已經(jīng)開(kāi)始自產(chǎn)自銷了,這是一項(xiàng)了不起的技術(shù)突破,不再依賴國(guó)外進(jìn)口,而且價(jià)格上也具有相當(dāng)?shù)膬?yōu)勢(shì)。
磁珠法核酸提取技術(shù)在多種樣本的核酸提取上都有顯著地效果,總結(jié)如下:植物、中草藥、植物病毒、動(dòng)物組織、動(dòng)物病毒、細(xì)菌、全血、血清、血清病毒、細(xì)菌質(zhì)粒、病毒、海洋生物、法醫(yī)樣本、骨骼、血斑、精斑、指甲、毛發(fā)、口腔拭子、煙蒂、禽類全血、真菌、PCR純化等。
與傳統(tǒng)提取DNA法相比速度更快!純度更高!一般情況下不需離心操作,單一樣品多應(yīng)在1h內(nèi)提取完畢,而磁珠法的最大優(yōu)勢(shì)還在于能夠配合核酸自動(dòng)提取儀和自動(dòng)化工作站進(jìn)行批量提取,1h之內(nèi)可以提取幾十甚至幾百個(gè)不同樣品的DAN。對(duì)全血、骨骼、植物等提取DNA在不PCR擴(kuò)增的情況下能在凝膠電泳中看到較為明亮的條帶。一般OD260/OD280在1.7-2.0左右,OD260/OD230在2以上,電泳條帶清晰,無(wú)拖尾現(xiàn)象,點(diǎn)樣孔無(wú)滯留,說(shuō)明純度較高,DNA片段完整,可直接用于PCR擴(kuò)增的模版。
最后以全血基因組DNA提取為例,展示磁珠法核酸提取的效果: